Universität Stuttgart
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Item Open Access The use of the tip potential of glass microelectrodes in the determination of low cell membrane potentials(1973) Hülser, Dieter F.; Webb, Dennis J.The tip potential of Ling-Gerard glass microelectrodes changes upon insertion into cells and thus impedes the determination of the actual membrane potential. The lower the membrane potential of a cell, the larger will be the error due to this tip potential. However, as is demonstrated, a relationship exists between the tip potential of the electrode and the measured potential difference, which allows the determination of the membrane potential of a particular cell type by linear regression. This method showed that resting lymphocytes had no membrane potential, whereas for the slime mould Dictyostelitium discoideum a membrane potential of about -9 mV could be calculated.Item Open Access Characteristics of three nuclear emulsions for autoradiography at the electron microscope(1966) Hülser, Dieter F.; Rajewsky, Manfred F.Drei handelsübliche Kernspuremulsionen, Gevaert NUC 307, Ilford L4 und Kodak NTE, wurden wegen ihrer geringen Korngröße auf ihre Eignung zur elektronenmikroskopischen Autoradiographie untersucht. Korngrößenverteilungskurven wurden aufgenommen und ein geeigneter Entwickler ausgesucht. Zur Bestimmung der Empfindlichkeit dieser drei Emulsionen wurden Einkornschichten im Elektronenmikroskop mit Elektronen einer Energie von 5,7 keV, der mittleren beta-Energie des Tritiums, bestrahlt. Anschließend wurden die Emulsionen entwickelt, aber nicht fixiert. Mit dem Anteil der entwickelten AgBr-Körner kann dann über Trefferkurven die Empfindlichkeit der Emulsionen bestimmt werden. Man benötigt zur Bildung eines latenten Bildkeimes für die Ilford L4-Emulsion 1 - 1,4 Elektronen pro AgBr-Korn, für die Gevaert NUC 307-Emulsion 2 - 3 und für die Kodak NTE-Emulsion 4 - 5 Elektronen pro AgBr-Korn. Folgerungen für das Auflösevermögen bei radioaktiven Punkt- und Flächenquellen werden diskutiert. Fortschritte in der Mikroautoradiographie werden von der Entwicklung feinkörniger Emulsionen abhängen, deren Empfindlichkeit bei etwa einem Elektron pro AgBr-Korn liegen sollte.Item Open Access Untersuchungen zur Synchronisation in vivo: temporäre Inhibition der DNA-Synthese durch Hydroxyharnstoff in normalen und malignen Säugerzellsystemen(1971) Rajewsky, Manfred F.; Hülser, Dieter F.; Fabricius, ErikaDie Bearbeitung einer Reihe von Problemstellungen der experimentellen und klinischen Krebsforschung setzt die Möglichkeit einer Synchronisation proliferierender Zellsysteme in vivo voraus. Dies gilt z. B. für die Frage, ob bei Säugerzellen als Funktion ihrer Position im Zellcyclus Empfindlichkeitsunterschiede vorhanden sind, und zwar sowohl hinsichtlich der Auslösbarkeit des Prozesses der malignen Transformation durch Cancerogene, als auch in bezug auf die Inaktivierbarkeit maligner Zellen durch cytocide Agentien oder ionisierende Strahlung. In der vorliegenden Arbeit wird über Untersuchungen zur in vivo-Synchronisation verschiedener Gewebe (Embryo; Leber; Milz; transplantabler BICR/M1R-Tumor) der Ratte durch temporäre Blockade der DNA-Synthese mit Hydroxyharnstoff (HU) berichtet.Item Open Access Elektronenmikroskopische Befunde bei einer Affenseuche (Cercopithecus aethiops)(1968) May, Gerhard; Knothe, Hans; Hülser, Dieter F.; Herzberg, KurtDie elektronenmikroskopischen Befunde von G. Müller und D. Peters, die den Erreger einer Affenseuche (Cercopithecua aethiops) als gebogene Stäbe dargestellt haben, werden bestätigt und erweitert. Es gelang, die ätiologische Bedeutung dieser Formen durch die Kombination von Gewebekultur (menschliche Amnionzellen), Tierversuch (Meerschweinchen) und elektronenmikroskopischem Befund in dieser Reihenfolge zu sichern.Item Open Access Elektronenmikroskopische Autoradiogramme: unterschiedliche Empfindlichkeit von Photoemulsionen gegenüber Tritium(1971) Hülser, Dieter F.; Rajewsky, Manfred F.The sensitivity of the photographic emulsion is an important factor in the resolution of autoradiographs at the electron microscopic level. In a number of recent publications, single hit processes have been considered sufficient for the production of developable latent images by tritium electrons. However, since the absorbed energy required or latent image formation in AgBr crystals of commercially available emulsions is of the order of 800 eV, onIy low energy tritium electrons (up to 3 keV) will produce latent images by single hit processes in small AgBr crystals of about 400 A diameter. In emulsions with larger AgBr crystals (about 1000 A diameter), electrons with an energy of up to about 6 keV can be regisiered by single hit processes. Evidently, latent image formation may also result from multiple hits by electrons of higher energy. Since the energy absorption required for latent image formation is constant, the sensitivity of photographic emulsions must be considered proportional to the diameter of the respective AgBr crystals, unless methods become available for specific sensitization of emulsions with small AgBr crystals.Item Open Access Ionic coupling between nonexcitable cells in culture(1974) Hülser, Dieter F.In the following sections, the electrophysiological techniques used for the demonstration of low-resistance junctions by the occurrence of ionic coupling pulses will be described. It will also be shown that for the analysis of coupling phenomena between cells, electrical parameters such as potential difference, membrane resistance, and capacitance must be taken into account. In addition, the electrical and mechanical instrumentation necessary for such measurements will be described with special emphasis on electrophysiological studies in cultured cells. Based on experiments with lymphocytes it will be shown that low-resistance junctions can be built up within minutes and that in the case of cells of established lines in culture their existence is related neither to normal nor to malignant cell properties, but appears to be associated with fibroblastoid cells.Item Open Access Intercellular communication in phytohemagglutinin - induced lymphocyte agglutinates(1971) Hülser, Dieter F.; Peters, Johann H.Intercellular communication, as indicated by ion flow between cells, was measured with micro-glass-electrodes in lymphocytes immediately after addition of phytohemagglutinin.Item Open Access Morphologische Befunde an fixierten und unfixierten Mykoplasmen(1967) Reuss, Karl; Plescher, C.; Hülser, Dieter F.; Herzberg, KurtUnfixierte Mykoplasmen erschienen im negativkontrastierten Präparat, je nach den Trocknungsbedingungen auf der Objektblende, bizarr und vielgestaltig mit mehr oder weniger langen Filamenten oder abgeplattet mit nur gelegentlichen Ausläufern. Diese verschiedenartigen Formen konnten durch Änderung der PWS-Schichtdicke auf der Blende beliebig erzeugt werden. Im formalinfixierten Präparat aus dem gleichen Ausgangsmaterial waren alle Partikel annähernd rund und ohne Fortsätze. Nicht nur Filamente, sondern auch Abschnürungen kleiner Partikel konnten künstlich erzeugt werden. Ausstülpungen und Abschnürungen in P\VS-kontrastierten Präparaten sind daher nicht ohne weiteres als Sprossungsvorgänge anzusehen. Die Existenz einer an der Oberfläche von kleinen Mykoplasmenformen beschriebenen "flockulären Substanz", die bei diesen zu der Bezeichnung "myxoviruslike elementary bodies" geführt hat, wird bestätigt. Sie findet sich auch an großen Mykoplasmen. Es wird auf Unterschiede zu den Spikes des Influenzavirus hingewiesen.Item Open Access Fibroblastoid and ephitelioid cells in tissue culture: differences in sensivity to ouabain and on phospholipid composition(1974) Hülser, Dieter F.; Ristow, Hans J.; Webb, Dennis J.; Pachowsky, Heinz; Frank, WernerInvestigations on nine different mammalian cell lines revealed that permanently growing cells of one morphological class have numerous membrane properties in common which are different or even lacking in the other cell class. With electrophysiological methods it is shown that the sensitivity of the Na+-K+ pump to ouabain is three orders of magnitude higher in the ionically non-coupled epithelioid cells than in the ionically coupled fibroblastoid cells which respond like primary cultures. This is accompanied by considerably higher binding constants for ouabain of the epithelioid cells as was shown by [3 H] ouabain binding and membrane potential measurements. The epithelioid cells also revealed a 50% lower relative amount of phosphatidylethanolamine and a 60-fold less net synthesis of phospatidylinositol. Finally, although primary cultures cannot proliferate without serum, permanent fibroblastoid cells have a reduced serum requirement and permanent epithelioid cells can proliferate without any serum.Item Open Access Stimulierung von Kulturen embryonaler Rattenzellen durch eine Proteinfraktion aus fötalem Kälberserum : 1, Elektrophysiologische Messungen an den Oberflächenmembranen(1971) Hülser, Dieter F.; Frank, WernerNormal embryonic rat cells incubated in serum-free medium accumulate in G1-phase of the cell cycle. On addition of a growth stimulating protein isoIated from fetal calf serum they are triggered to proceed through the cycle and they resume DNA synthesis 15 to 20 hour later. In this paper it is demonstrated that the surface membrane potential difference (PD) decreases immediately after changing serum-free medium against culture medium containing either calf serum or the isolated serum protein; the original PD is restored 2 to 3 hours later. Serumprotein without growth-stimulating activity does not affect the PD. A permanent rat cell line which grows independently of serum also has been tested. The PD of these cells is not significantly influenced by calf serum.
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